一、NUS開發出檢驗免疫細胞能力的新測法

　　新加坡國立大學(NUS)健康創新與技術研究所的助理教授Cheow Lih Feng與他的團隊成員Luah Yen Hoon博士和Wu Tongjin博士一起設計了一種簡單而創新的方法來直接識別和分類參與細胞介導的細胞毒性的免疫細胞。

　　“我的團隊提出的新方法在識別能夠有效消除目標細胞的殺傷細胞方面具有高度選擇性。這與其他細胞介導的細胞毒性表征技術形成鮮明對比，后者是勞動密集型的，耗時且選擇性較低，”來自新加坡國立大學設計與工程學院生物醫學工程系的助理教授Cheow說。

　　這種新方法發表在2023年8月31日的《自然生物醫學工程》雜志上。

　　操作流程：

　　1、將殺傷細胞涂成綠色

　　在細胞介導的細胞毒性過程中，一些免疫細胞可以通過細胞裂解釋放蛋白質來破壞外來細胞，從而觸發一系列破壞外來細胞的細胞過程。這些表現出細胞殺傷行為的免疫細胞被稱為殺傷細胞。一旦這些外來細胞被殺死或溶解，它們會將細胞內的內容物泄漏到周圍區域。

　　在這個概念的基礎上，NUS團隊提出了一種方法，可以在負責摧毀這些外來細胞的殺傷細胞表面“涂上”顏料。研究人員將這種新方法命名為PAINTKiller(即“殺傷細胞的近距離親和力細胞內轉移鑒定”)。

　　新加坡國立大學的研究人員使用一種被稱為羧基熒光素琥珀酰酯(CFSE)的細胞內染色染料來染色外來細胞。這種無毒染料可以進入細胞并留在細胞內。然后，研究小組對免疫細胞的表面進行了修飾，以便在細胞裂解過程中，當外源細胞釋放CFSE染料時，這種受體能夠捕獲CFSE染料，從而使他們能夠識別出負責的殺傷細胞。

　　2、為免疫治療應用分類殺傷細胞

　　繼PAINTKiller方法的成功設計之后，Cheow助理教授和他的團隊進行了一項實驗，以研究使用PAINTKiller對參與細胞介導的細胞毒性的殺傷細胞亞型進行分類的可能性。研究小組證明，與未標記的殺傷細胞相比，用CFSE染料標記的殺傷細胞在殺死外來細胞方面表現出更好的性能。

　　使用CFSE染料作為標識符，NUS的研究人員能夠對殺傷細胞的亞型進行分類和提取，并將它們分開培養。他們還發現，使用PAINTKiller方法用CFSE標記的免疫細胞具有更好的殺傷能力，即使在12天后仍然有效。

　　這些有希望的結果表明，PAINTKiller可以為生產更高質量的基于細胞的免疫療法提供潛在的策略。

　　3、擴大PAINTKiller在分析細胞介導的細胞毒性中的應用

　　為了證明PAINTKiller的靈活性，NUS研究人員將其與一種稱為細胞因子分泌法(CSA)的方法結合起來，該方法測量免疫細胞在免疫反應期間釋放的稱為細胞因子的蛋白質。在這個實驗中，研究小組同時在殺傷細胞表面標記了可以捕獲CFSE和細胞因子的受體，這些受體是重要的細胞信號蛋白。

　　本實驗結果表明，PAINTKiller是一種強大的工具，能夠以高通量的方式全面靈活地檢測細胞介導的細胞毒性、蛋白質分泌和單個殺傷細胞的表面受體。

　　考慮到在細胞介導的細胞毒性過程中起作用的各種機制的復雜性，一個能夠測量細胞毒性能力、概述免疫細胞和蛋白質特征以及分析基因表達的多模式、高通量單細胞系統將有助于準確研究細胞介導的細胞毒性。

　　為此，NUS團隊突破了PAINTKiller方法的界限，開發了單細胞PAINTKiller-seq測定法，這是一種單細胞測序工作流程，集成了轉錄組分析、表型分析和遺傳分析的數據。

　　NUS研究小組正在努力擴大PAINTkiller方法的多功能性，通過在不同的殺傷細胞和外來細胞組合上進行測試，以揭示免疫反應復雜性背后的生物學原理，并將其開發為研究和臨床應用的不可或缺的工具。

　　二、NUS大學介紹

　　NUS是環太平洋大學聯盟、亞洲大學聯盟、亞太國際教育協會、國際研究型大學聯盟、新工科教育國際聯盟、國際應用科技開發協作網等高校聯盟的成員，也是AACSB (Association to Advance Collegiate Schools of Business) 和EQUIS (European Quality Improvement System) 的認證成員。

　　學校建校一百多年來，涌現出了無數杰出校友，在政治領域尤其突出。如新加坡第二任總理吳作棟、新加坡第二任總統本杰明?亨利?薛爾思、新加坡第七任總統陳慶炎、馬來西亞第二任總理阿卜杜勒?拉扎克、馬來西亞第四任總理馬哈蒂爾?穆罕默德和新加坡總理李顯龍的夫人何晶等。

　　NUS排名一直在亞洲乃至世界的前列：

　　2024年QS世界排名第8位

　　2024年QS亞洲排名第3位

　　2024年泰晤士高等教育世界大學排名第29位

　　2023年泰晤士高等教育世界亞洲排名第3位

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